Investigador principal: Angel Hernández Hernández (angelhh@usal.es)

Otros investigadores: Marcial Llanillo Ortega (llanillo@usal.es)

Estudiantes predoctorales:
Rodrigo Prieto Bermejo
Alejandro Pérez Fernández
Marta Romo González

Estudiantes de Máster:
Tamara Jiménez Solas
Carla Ijurko Valeta

Dirección:
Edificio Departamental, Lab 122
Pza Doctores de la Reina
37007 Salamanca, España
Tfno: +34 923 294 781
Fax: +34 923 294 579

Líneas de Investigación
Nuestro grupo de investigación está interesado en los mecanismos moleculares que regulan la diferenciación hematopoyética. En los últimos años se está poniendo de manifiesto la importancia de las especies reactivas del oxígeno o ROS en el control de la señalización celular. En este contexto la familia de las NADPH oxidasas juegan un papel central, ya que son el único sistema celular especializado en la producción de ROS en respuesta a distintas señales. Nuestro equipo ha demostrado la importancia de las NADPH oxidasas para la diferenciación megacariocítica in vitro. Además, una producción excesiva de ROS se relaciona con el desarrollo y la progresión tumoral, y nuestros datos demuestran que las NADPH oxidasas son una interesante diana terapéutica frente a la leucemia mieloide. Nuestro objetivo es profundizar en el papel de las NADPH oxidasas en la hematopoyesis in vivo y en su uso como dianas terapéuticas frente a la leucemia.
Para comprender el papel de las NADPH oxidasas en la señalización celular es necesario entender cómo los ROS regulan la actividad de las proteínas señalizadoras. La actividad de las proteínas tirosina fosfatasas (PTPs) se regula por oxidación reversible, lo que las convierte en una de las dinas más habituales de la señalización redox. En los últimos años hemos estudiado el papel de una de las enzimas de esta familia en la hematopoyesis, PTPN13. De acuerdo con nuestros resultados PTPN13 regula los niveles de beta-catenina, y dichos niveles son importante para el control de la quiescencia y la unión al nicho de las células madre hematopoyéticas in vivo. Actualmente estamos estudiando los mecanismos moleculares que explican este fenómeno.

Técnicas experimentales
-Cultivos celulares
-Citometría de flujo para el análisis de la hematpoyesis
-Análisis de los niveles de ROS intracelulares
-Transferencia de western
-Técnicas de clonaje, PCR, PCR a tiempo real
-Transfección e infección lentiviral
-Silenciamiento mediante RNAi
-Trasplante hematopoyético
– Microscopía de fluorescencia

Modelos experimentales:
– Líneas celulares. Generación de líneas estables silenciadas o de sobreexpresión para genes de interés.
– Diferenciación megacariocítica in vitro
– Cultivos primarios de células hematopoyéticas de pacientes leucémicos.
– Cultivos primarios de progenitores hematopoyéticos.
– Silenciamiento génico en progenitores hematopoyéticos
– Ensayos de trasplante hematopoyético in vivo en modelos animales

Financiación:
– Ministerio de Economía y Competitividad (BFU2014-56490-R). 2015-2017.
– Fundación Ramón Areces. 2015-2017.

Areas of Research
Our group is interested in the molecular mechanisms that govern hematopoietic differentiation. During the last few years the importance of reactive oxygen species (ROS) in the control of cellular signalling is becoming widely accepted. In this context, the NADPH oxidases family plays a leading role. These enzymes are the only cellular systems specialized in ROS production upon different stimuli. We have recently shown the importance of NADPH oxidase ROS production for megakaryocytic differentiation in vitro. Besides, an excessive ROS production or oxidative stress has been related with tumour transformation and progression. In this regard, we have recently shown that the NADPH oxidase family is an interesting therapeutic target against myeloid leukaemia. Our aim is to analyse the role of NADPH oxidases during in vivo haematopoiesis, and their potential use as therapeutic targets against leukaemia.
In order to understand how NADPH oxidases regulate cellular signalling it is necessary to comprehend how ROS regulate the activity of signalling proteins. The activity of protein tyrosine phosphatases (PTPs) is regulated in vivo by reversible oxidation. Therefore, regulation of PTPs is deeply involved in the so-called redox signalling. During the last few years we have been studying of one of the members of this family, PTPN13. Our evidences show that PTPN13 regulates beta-catenin levels, and such levels are important to regulate the quiescence and the attachment to the niche of hematopoietic stem cells (HSCs). We are currently investigating the molecular mechanisms that are behind these observations.